生物堿的鑒別方法(生物堿的化學(xué)鑒定試驗一般需要作幾種)
1.生物堿的化學(xué)鑒定試驗一般需要作幾種
中草藥中生物堿的含量測定一般包括三個(gè)步驟——提取、分離精制與含量測定。現將常用方法筒述如下：
1.提取： 稱(chēng)取一定量的藥材，根據生物堿的溶解性能堿化后用有機溶劑提取或用酸水或用乙醇提取得游離生物堿或其鹽類(lèi)。提取方法用冷浸法、滲漉法、口流提取法、離子交換法均可。
2.分離精制： 多用溶劑法。利用生物堿在酸水中成鹽，不溶于有機溶劑，堿化后游離易溶于有機溶劑的性質(zhì)，反復于分液漏斗中萃取精制。有時(shí)亦可加某些試劑使雜質(zhì)沉淀而除去或用氧化鋁柱層析法去除雜質(zhì)。
3.含量測定： 以容量法應用最多，亦可用重量法、比色法、可見(jiàn)光與紫外光分光光度法、層析法等。容量法中又以酸堿滴定法較簡(jiǎn)便常用。即將用上述方法提取精制所得之生物堿溶于過(guò)量標準酸溶液中，用標準堿液回滴，從消耗的酸量算出生物堿的含量。
如果中草藥中所含生物堿不止一種，則測得的為總生物堿含量，而以其中主要生物堿為代表計算的近似值。如需準確地測定某一生物堿的含量，則應分離得個(gè)別生物堿后再行測定。
2.天然藥物化學(xué)中生物堿的結構·理化性質(zhì)·提取分離方法·檢識鑒定
結構類(lèi)型：由于生物堿的種類(lèi)很多，各具有不同的結構式，因此彼此間的性質(zhì)會(huì )有所差異。但生物堿均為含氮的有機化合物，總有些相似的性質(zhì)，生物堿具環(huán)狀結構，難溶于水，與酸可以形成鹽，有一定的旋光性和吸收光譜，大多有苦味。呈無(wú)色結晶狀，少數為液體。生物堿有幾千種，由不同的氨基酸或其直接衍生物合成而來(lái)，是次級代謝物之一，對生物機體有毒性或強烈的生理作用。
理化性質(zhì)：一般為無(wú)色，不論生物堿本身或其鹽類(lèi)，多具苦味，有些味極苦而辛辣，還有些刺激唇舌的焦灼感。 大多呈堿性反應。但也有呈中性反應的，如秋水仙堿；也有呈酸性反應的，如茶堿和可可豆堿；也有呈兩性反應的，如嗎啡（Morphine）和檳榔堿（Arecaadine）。大多數生物堿均幾乎不溶或難溶大多數生物堿含有不對稱(chēng)碳原子，有旋光性，多數呈左旋光性。只有少數生物堿，分子中沒(méi)有不對稱(chēng)碳原子，于水。能溶于氯仿、乙醚、酒精、丙酮、苯等有機溶劑。也能溶于稀酸的的水溶液而成鹽類(lèi)， 在常壓時(shí)絕大多數生物堿均無(wú)揮發(fā)性
提取分離：生物堿-水或酸水提取法
1）根據生物堿與酸成鹽后易溶于水、難溶于親脂性有機溶劑的性質(zhì)。
2）生物堿若具有一定堿性，在植物體內都以鹽的形式存在，故可采用水或酸水提取中華醫學(xué)學(xué)/習網(wǎng)搜集整理。
3）生物堿多以有機酸鹽的形式存在，對水的溶解度較小，所以多選用無(wú)機酸水使植物體內的生物堿大分子有機酸鹽轉變成小分子無(wú)機酸鹽，而增大其在水中的溶解度，故多用酸水提取。
4）常用0.1%~l%的硫酸或鹽酸溶液作為提取溶劑，采用浸漬法或滲漉法提取，個(gè)別含淀粉少者可用煎煮法。
5）缺點(diǎn)：此法比較簡(jiǎn)便，但提取液體積較大，濃縮困難，而且水溶性雜質(zhì)多，需進(jìn)一步采用下列方法純化和富集。
1.陽(yáng)離子樹(shù)脂交換法
生物堿陽(yáng)離子，能與陽(yáng)離子交換樹(shù)脂發(fā)生離子交換反應，被交換到樹(shù)脂上。
操作：含有總堿的酸水提取液通過(guò)強酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，使生物堿陽(yáng)離子交換到樹(shù)脂上，而非生物堿化合物則流出柱外，用中性水或乙醇進(jìn)一步洗除柱中的雜質(zhì)中華醫學(xué)學(xué)/習網(wǎng)搜集整理。
①堿化后用氯仿或乙醚提取：將交換后的樹(shù)脂晾干，用氨水堿化至pH值為l0左右，使生物堿從樹(shù)脂中游離出來(lái)，再用氯仿或乙醚等有機溶劑回流提取，回收溶劑即可得到總生物堿。
②堿性乙醇洗脫中華醫學(xué)學(xué)/習網(wǎng)搜集整理。
③ 酸水或酸性乙醇洗脫。
2.萃取法
酸水提取液堿化，使生物堿游離，如沉淀，則濾過(guò)即得；如不沉淀，可以適合的親脂性有機溶劑萃取，回收溶劑，即得總生物堿。
一般來(lái)說(shuō)，酸水提取，堿水沉淀是通用的方法，再找合適的溶劑將沉淀中的生物堿提取出來(lái)，就可以了。酸水中酸的量視生物堿的多少而定，一般都需要過(guò)量一些。
醇提取液
│
↓濃縮
浸膏
│
│酸水溶解
┌——————┴———————————┐
↓ ↓
不溶物 酸水液
（非堿性脂溶性雜質(zhì)） │
│堿化，親脂性有機溶劑萃取 [用氫氧化鈉調節到PH=10 ] ┌———┴———┐
↓ ↓
有機溶劑層 水層
│
│濃縮
↓
總生物堿
鑒別：1物性測 定 測定化合物的溶沸點(diǎn)、比旋光度等物理參數 ， 與 已知生物堿的物理參數進(jìn)行 比較
2化學(xué)降解反應 為經(jīng)典的結構測定方法， 將分子降解為幾個(gè)穩定 的碎片 ， 它們通常是一些比較易于鑒別或可通過(guò)合成 證明的簡(jiǎn)單化合物， 然后按降解原理推導出原來(lái)可能 的化學(xué)結構
3氧化 反應 是一種應用于生物堿結構研究的方法， 即通過(guò)將 化合物氧化裂解成小分子化合物推知該化合物環(huán)狀 結構的類(lèi)型和取代基的種類(lèi)及位置。
4滴定法的原理是酸堿中和反應 。人工滴定法是 根據指示劑的顏色變化指示滴定終點(diǎn)， 然后 目測標準 溶液消耗體積， 計算分析結果。自動(dòng)電位滴定法是通 過(guò) 電位的變化 ， 由儀器 自動(dòng)判斷終點(diǎn)。滴定法簡(jiǎn) 便、經(jīng)濟、快速， 但相對標準偏差較大。
5紫外吸收光譜法
6紅外光譜 法
7質(zhì)譜 法
8核 磁 共振譜
9高 效 液 相 色譜 法
氣 相 色譜 法
超 臨界 流體 色譜
毛細管電泳法
