軟式內鏡的低溫滅菌方法(手術(shù)剪和內鏡等最常用的滅菌方法是)

1.手術(shù)剪和內鏡等最常用的滅菌方法是

比較常用的有五種

（一）熱力滅菌法

熱力能破壞微生物的蛋白質(zhì)和核酸，使蛋白質(zhì)變性凝固，核酸解鏈崩裂，從而導致其死亡。

1.干熱滅菌法 常用焚燒、燒灼和干烤等方法。

(1)焚燒與燒灼 焚燒僅用于廢棄的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及動(dòng)物尸體等。燒灼用于微生物實(shí)驗室的接種環(huán)、金屬器械、試管口、瓶口等的滅菌。

(2)干烤 使用干烤箱滅菌，一般需加熱至160℃~170℃經(jīng)2h，可達到滅菌的目的。適用于玻璃器皿、瓷器、金屬物品等的滅菌。

2.濕熱消毒滅菌法

(1)巴氏消毒法 法國學(xué)者巴斯德創(chuàng )用而得名。主要以較低溫度殺滅病原菌或特定微生物，而使物品中不耐熱成分不被破壞。此法有兩種：一種方法是加熱61.1℃~62.8℃、30min；另一種方法是加熱71.7℃、15~30s。現在人們多用后種方法對牛奶進(jìn)行消毒。

(2)煮沸法 煮沸100℃、5~10min，可殺死細菌繁殖體。芽胞則需要煮沸1~2h。常用于注射器、食具與飲水的消毒。

(3)流通蒸氣法 用阿諾（Arnold）蒸鍋或普通蒸籠，加熱100℃、15~30min，可殺滅細菌的繁殖體。若將消毒后的物品放入37℃孵箱培養，使芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再蒸一次，如此連續三次以上，可達到滅菌效果，這種方法稱(chēng)為間歇滅菌法。常用于不耐高溫的物品，如糖類(lèi)、血清和雞蛋培養基等的滅菌。

(4)高壓蒸氣滅菌法 是一種迅速而有效的滅菌方法。使用高壓蒸氣滅菌器，利用加熱產(chǎn)生蒸氣，隨著(zhù)蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之升高，通常壓力在103.4kPa（相當舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 ）時(shí)，器內溫度可達121.3℃，維持15~30min，可殺滅包括芽胞在內的所有微生物。此法常用于一般培養基、生理鹽水、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌。

（二）紫外線(xiàn)與電離輻射

1.日光與紫外線(xiàn) 日光消毒是最簡(jiǎn)單、經(jīng)濟的方法，將病人的被褥、衣服、書(shū)報等在日光下曝曬數小時(shí)，可殺死表面的大部分微生物。日光中殺菌的成份主要是紫外線(xiàn)。紫外線(xiàn)200~300nm時(shí)，具有殺菌作用，其中以265~266nm波長(cháng)的紫外線(xiàn)殺菌力最強。紫外線(xiàn)的殺菌原理，主要是細菌DNA吸收紫外線(xiàn)后，一條鏈上相鄰的兩個(gè)嘧啶通過(guò)共價(jià)鍵結合形成二聚體，從而干擾了DNA的正常堿基配對，導致細菌死亡或變異。

紫紅外線(xiàn)能透過(guò)石英，但不能穿過(guò)一般玻璃或薄紙，因此，紫外線(xiàn)只適用于物體表面及空氣的消毒。例如手術(shù)室、嬰兒室、傳染病房、無(wú)菌制劑室、微生物接種室的空氣消毒。

2.電離輻射 X射線(xiàn)、γ射線(xiàn)和陰極射線(xiàn)等電離輻射，有較高的能量與穿透力，因而可產(chǎn)生較強的致死效應。其機制在于產(chǎn)生游離基，破壞DNA。此法常用于大量一次性醫用塑料制品的消毒；亦可用于中藥成藥和食品的消毒，而不破壞其化學(xué)成分和營(yíng)養成分。

（三）超聲波

超聲波是不被人耳感受的高于 20千周/s的聲波。其殺菌機制主要是它通過(guò)水時(shí)發(fā)生空化作用，而破壞了細菌細胞質(zhì)的膠體狀體，使其胞膜、胞質(zhì)分離，胞壁及胞膜破碎致細菌繁殖體死亡。此法主要用于粉碎細胞，以提取細胞組分或制備抗原等。

（四）微波

是一種波長(cháng)為 1mm到1m左右的電磁波，稱(chēng)微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面。目前用于消毒的微波有2,450MHz與915MHz兩種，常用于檢驗室用品、非金屬器械、無(wú)菌病室的食品用具及其它用品的消毒。

（五）濾過(guò)除菌

濾過(guò)除菌是用濾菌器阻留過(guò)濾液體和氣體的細菌，以達到無(wú)菌的目的。濾菌器含有微細小孔，只允許液體或氣體通過(guò)，而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過(guò)。常用濾菌器有蔡氏濾器、玻璃濾器、薄膜濾器及高效顆粒空氣濾器四種。主要用于不耐熱的血清、抗毒素、生物藥品以及空氣等的除菌。

2.軟式內鏡清洗消毒流程

原發(fā)布者：吻心717

軟式內鏡清洗消毒技術(shù)規范1 范圍本標準規定了軟式內鏡清洗消毒相關(guān)的管理要求、基本條件、操作規程等內容。本標準適用于開(kāi)展軟式內鏡診療工作的醫療機構。2 規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注時(shí)期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改單）適用于本文件。GB5749 生活飲用水衛生標準WS/T311醫院隔離技術(shù)規范WS/T313醫務(wù)人員手衛生規范GB 內鏡清洗消毒機（2012發(fā)布）GB 醫用清洗劑標準（2012發(fā)布）GB 消毒技術(shù)規范（2012發(fā)布）3 術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標準。3.1軟式內鏡 flexibleendoscope用于疾病診斷、治療的可彎曲的內鏡。3.2清洗cleaning使用含有醫用清洗劑的清洗用水，去除附著(zhù)于軟式內鏡的污染物的過(guò)程。3.3漂洗rinsing用流動(dòng)水沖洗清洗后軟式內鏡上殘留物的過(guò)程。3.4終末漂洗finalrinsing對消毒后的軟式內鏡進(jìn)行最終漂洗的過(guò)程。3.5內鏡清洗消毒機,AER用于內鏡復用處理，具有清洗與消毒功能的機器。3.6醫用清洗劑medicalcleaningagent用于醫療器械清洗，增強水的去污能力的化學(xué)制劑。4 管理要求4.1醫療機構的管理要求4.1.1開(kāi)展內鏡診療工作的醫療機構，宜按專(zhuān)業(yè)群分別建立集中的內鏡診療中心（室）。4.1.2醫療機構應將內鏡清洗消毒工作納入醫療質(zhì)量管理，制定和完善內鏡中心（室）醫院感染管理和內鏡清洗消毒的各

3.內鏡消毒效果監測采樣方法有哪些

4.1消毒內鏡采樣

4.1.1采樣方法：

4.1.1.1監測采樣部位為內鏡的內腔面。

4.1.1.2 用無(wú)菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用15ml無(wú)菌試管從活檢出口收集。及時(shí)送檢。

4.1.2 菌落計數：將送檢液用漩渦器充分振蕩，取0.5ml，加入2只直徑90mm無(wú)菌平皿，每個(gè)平皿分別加入已經(jīng)熔化的45℃-48℃營(yíng)養瓊脂15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35℃培養48小時(shí)后計數。

4.1.3 計算：兩平皿平均菌落數*20

4.2滅菌內鏡及附件

4.2.1腹腔鏡、宮腔鏡、膀胱鏡、關(guān)節鏡、腦室鏡等。

4.2.2 內鏡附件：活檢鉗、細胞刷、切開(kāi)刀、導絲、碎石器、網(wǎng)籃、造影導管、異物鉗等。

4.2.3采樣地點(diǎn)：生物安全柜、手術(shù)室、無(wú)菌室等。

4.2.4采樣方法：用無(wú)菌棉拭子涂抹后，剪去手接觸部分，放入10ml采樣液的試管中。及時(shí)送檢，2小時(shí)內檢測

4.3致病菌檢測：將送檢液用漩渦器充分震蕩，取0.2ml分別接種90mm血平皿、中國蘭血平皿和SS平皿，均勻涂布，35℃培養48小時(shí)，觀(guān)察有無(wú)病菌生長(cháng)。

4.4增菌：SCDLP（金葡、銅綠假單胞）、葡萄糖肉湯（乙型溶血性鏈球菌）、SF（亞硒酸鹽增菌液）、GN（志賀氏增菌液）、乳糖膽鹽發(fā)酵管。

4.5致病菌：金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌。

5. 結果判定

5.1消毒后的內鏡合格標準為：細菌總數5.2滅菌后內鏡合格標準為：無(wú)菌檢測合格。

5.3 內鏡結構復雜，關(guān)節多、孔道細長(cháng) （2--6英尺，直徑 幾毫米），

5.4.使用時(shí)， 易沾掛血液、黏液、組織、排泄物等。

5.5.胃鏡在應用后，可有105-1010cfu/mL的生物負載。

5.6.支氣管鏡在清洗前， 平均負載為6.4*104cfu/mL。

4.滅菌方法有哪些

1.干熱滅菌法

1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要是用于接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌，火焰滅菌通常用于無(wú)菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過(guò)火焰數次，利用火焰對管口等進(jìn)行滅菌，阻止管口污染，作為無(wú)菌操作過(guò)程中的輔助滅菌手段。

1.2干烤滅菌：利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后，均可在烤箱內干熱滅菌。通常加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌。但不宜超過(guò)170℃，玻璃量具易變形。降溫過(guò)速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時(shí)裝入干烤箱內的物品切勿緊密，應有空隙，利于熱空氣流動(dòng)，過(guò)密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底。

2.濕熱滅菌法

通過(guò)加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，穿透力強，溫度高，滅菌效果最好。

注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣。有冷空氣存在時(shí)，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時(shí)，為保證達到規定的溫度，必須將冷空氣完全排除。否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規定的要求，滅菌就不徹底。

3.紫外線(xiàn) 殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制。

紫外線(xiàn)消毒效果與紫外線(xiàn)強度、照射時(shí)間、溫度與濕度等因素有關(guān)。

我國規定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。一般紫外燈使用超過(guò)100h，則應更換。表面有塵土，降低滅菌效果。紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對濕度40%~60%為宜。

5.什么叫滅菌

(1)加熱滅菌法 利用高溫來(lái)殺死微生物（超過(guò)最高生長(cháng)溫度）的方法。

加熱滅菌的原理：當高溫作用于微生物時(shí)，首先引起細胞內生理生化反應速率加快，機體內對溫度敏感的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸等，隨著(zhù)溫度的增高而遭受不可逆的破壞，盡而導致細胞內原生質(zhì)體的變化、酶結構的破壞，從而使細胞失去了生活機能上的協(xié)調，停止了生長(cháng)發(fā)育。隨著(zhù)高溫的繼續作用，細胞內原生質(zhì)便發(fā)生凝固，酶結構完全破壞，活動(dòng)消失，生化反應停止，滲透交換等新陳代謝活動(dòng)消失，細胞死亡。

加熱滅菌可分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類(lèi)。 1）干熱滅菌 利用灼燒或干熱空氣滅菌而沒(méi)有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱(chēng)為干熱滅菌法。

由于干熱滅菌使用方便，方法簡(jiǎn)單，故在生產(chǎn)上廣泛應用。如火焰滅菌法：直接利用火焰把微生物燒死，故又稱(chēng)焚燒滅菌法。

采用此法滅菌既徹底又迅速，但只適用于金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法：即在電熱恒溫干燥箱中利用干熱空氣來(lái)滅菌。

2）濕熱滅菌 即利用蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。

①高壓蒸汽滅菌 由于高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度，能大大縮短滅菌時(shí)間，提高工作效率，加之蛋白質(zhì)在濕熱條件下容易變性，在熱蒸汽條件下，細菌的芽孢在120℃，經(jīng)20~30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大，不易被穿透時(shí)，可將壓力增加到0.152兆帕，延長(cháng)至1~2小時(shí)。

在高壓蒸汽滅菌中，滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高（圖2-6）。 圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋 在使用高壓滅菌鍋時(shí)，要完全排出鍋內的空氣而以飽和蒸汽代之。

如果空氣不排除干凈，則鍋內溫度將低于同樣壓力下由純飽和蒸汽產(chǎn)生的溫度，影響滅菌效果。 此法適用于各種耐熱物品的滅菌，如一般培養基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。

所采用的蒸汽壓力與時(shí)間，應根據待滅菌物品的性質(zhì)、體積與容器類(lèi)型等決定。 ②常壓蒸汽滅菌 這是采用自然壓力、100℃蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。

它設備簡(jiǎn)單、成本低，當前使用最廣泛。只要砌一個(gè)爐灶，買(mǎi)1~2只大鍋，上面用磚和水泥砌成，也可用大鐵桶、木桶等，體積大小可自行決定，但不宜過(guò)大，以裝800~1500瓶為好。

設計常壓灶時(shí)應注意的問(wèn)題：大小根據生產(chǎn)規模來(lái)定，灶頂部最好制成拱圓形，這樣冷凝水可沿灶的內壁下流而不會(huì )打濕棉塞；灶倉內要有層架結構，以便分層裝入滅菌物；灶上應安裝溫度計，可隨時(shí)觀(guān)察灶內溫度的變化；因滅菌時(shí)間長(cháng)，鍋內水不夠蒸發(fā)，故容量大的灶要安裝加水裝置；灶倉的密閉程度要盡可能高，這樣既提高滅菌效果，又節省燃料。菇農在生產(chǎn)中還常用一種小型蒸汽發(fā)生裝置，引出蒸汽后直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進(jìn)行常壓滅菌。

這種方法不用建灶，簡(jiǎn)便省工（圖2-7）。常壓滅菌一般水燒開(kāi)后保持8~10小時(shí)，悶一夜即可。

圖2-7 簡(jiǎn)易常壓滅菌法 ③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內，100℃處理1小時(shí)左右，殺死微生物的營(yíng)養細胞，讓其冷卻至30℃左右，此時(shí)芽胞會(huì )萌發(fā)，再以同樣方法加熱處理，反復3次，可達到滅菌目的。

該方法可用于不耐高溫的藥品、營(yíng)養物、特殊培養基的滅菌。 ④低溫巴氏滅菌法 即在60~70℃下，經(jīng)一定時(shí)間，殺死有害微生物的方法。

適應于不耐高溫的物品消毒。有些培養基，在高溫下遭到破壞，用此法既可殺死致病微生物的營(yíng)養體，又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。

食用菌生產(chǎn)中培養料堆積發(fā)酵工藝，就是利用這個(gè)原理殺死其中的病蟲(chóng)、雜菌。 （2）過(guò)濾除菌法 又分液體過(guò)濾和空氣過(guò)濾兩種，就是采用機械的方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過(guò)濾器，通過(guò)機械過(guò)濾，只讓液體培養基或空氣從篩孔流出，各種微生物菌體則留在篩子上，從而達到除菌的目的。

這種方法適用于對熱不穩定的體積小的液體培養基（如動(dòng)物血清、蛋白質(zhì)、酶、維生素等）及氣體的滅菌。超凈工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過(guò)過(guò)濾滅菌形成無(wú)菌空氣，從風(fēng)洞中吹出，來(lái)造成工作臺范圍的無(wú)菌狀態(tài)。

過(guò)濾滅菌的最大優(yōu)點(diǎn)是不破壞培養基中各種物質(zhì)的化學(xué)成分。常用的過(guò)濾器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的，也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜制成的。

（3）輻射滅菌法 利用輻射產(chǎn)生的能量進(jìn)行殺菌的方法稱(chēng)輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種，α-射線(xiàn)、β-射線(xiàn)、γ-射線(xiàn)、X-射線(xiàn)、中子和質(zhì)子、微波等屬電離輻射，紫外線(xiàn)、臭氧、日光為非電離輻射。

1）紫外線(xiàn)滅菌 紫外線(xiàn)殺菌的原理是利用紫外線(xiàn)的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發(fā)生光化學(xué)反應，將細菌細胞質(zhì)誘導形成胸腺嘧啶雙聚體，從而抑制DNA的復制而發(fā)生變性、致死。

另一方面，空氣在紫外線(xiàn)照射下產(chǎn)生的臭氧（O3），也具有一定的殺菌作用。紫外線(xiàn)的有效作用距離為1.2~2.0米。

紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方，個(gè)數依房間大小而定，容1~2個(gè)人操作的接種室，安裝一個(gè)30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前，應將所需的器具一起放入接種室（箱）內，然后打開(kāi)紫外燈照射。

如果接種室體積較大，開(kāi)燈照射2小時(shí)。