苷的水解方法(苷的酶水解酶)

1.苷的酶水解有哪些酶

目的采用β-葡萄糖苷酶水解黃芪甲苷，并對其酶水解動力學(xué)進(jìn)行初步研究。

方法以HPLC-ELSD法檢測水解液中黃芪甲苷及水解產(chǎn)物環(huán)黃芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷（CMG）的量，以黃芪甲苷的水解轉(zhuǎn)化率為指標(biāo)，考察各反應(yīng)因素對轉(zhuǎn)化率的影響，并對該反應(yīng)進(jìn)行動力學(xué)研究。結(jié)果最佳反應(yīng)條件為反應(yīng)溫度50℃，溶液pH值5.0，酶濃度460 U/mL，底物初始濃度0.1 mmol/L，反應(yīng)時間48 h；在此條件下，水解轉(zhuǎn)化率達(dá)到90%以上。

在最佳反應(yīng)條件下，該水解反應(yīng)過程符合單底物Michaelis Menten方程，其中最大反應(yīng)速率（Vm）值為0.037 mmol/(L.min)，米氏常數(shù)（Km）值為5.8 mmol/L。結(jié)論采用β-葡萄糖苷酶水解黃芪甲苷制備CMG可行；商品化的β-葡萄糖苷酶并非黃芪甲苷的特異性水解酶。

2.苷類水解的注意事項

苷類水解的注意事項 ①按苷鍵原子不同，酸水解的易難順序為：N-苷>O-苷>S-苷>C-苷。

②呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解。

③酮糖較醛糖易水解。

④吡喃糖苷中吡喃環(huán)的C-5上取代基越大越難水解，因此五碳糖最易水解，其順序為五碳糖>甲基五碳糖>六碳糖>七碳糖。如果接有-COOH，則最難水解。

⑤氨基糖較羥基糖難水解，羥基糖又較去氧糖難水解。

⑥芳香屬苷，如酚苷因苷元部分有供電子結(jié)構(gòu)，水解比脂肪屬苷如萜苷、甾苷容易得多。

⑦苷元為小基團者，苷鍵橫鍵的比苷健豎鍵的易水解，因為橫鍵上原子易于質(zhì)子化。苷元為大基團者，苷鍵豎鍵的比橫鍵的易水解，因為苷的不穩(wěn)定性促使水解。

⑧N- 苷易接受質(zhì)子，但當(dāng)N原子處于嘧啶或酰胺位置時，N-苷也難于用礦酸水解。