細(xì)胞的顯微測量(用生物顯微鏡進(jìn)行測量時,應(yīng)注意哪些)

1.用生物顯微鏡進(jìn)行測量時,應(yīng)注意哪些

使用生物顯微鏡時應(yīng)注意的事項(xiàng)

⒈取放時動作一定要輕，切忌震動和暴力，否則會造成光軸偏斜而影響觀察，而且光學(xué)玻璃也容易損壞。

⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷，安裝物鏡時要特別小心，即先向左方倒轉(zhuǎn)一小段，凹凸雙方吻合后再向右方旋轉(zhuǎn)，不要轉(zhuǎn)的太緊，輕輕捻到頭，再稍緊即可。

⒊鏡檢標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格按照操作程序進(jìn)行，觀察時要從低倍鏡開始，看清標(biāo)本后再轉(zhuǎn)用高倍鏡、油鏡。

⒋使用油鏡時一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后，應(yīng)立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈，否則干后不易擦去，以致?lián)p傷鏡頭和標(biāo)本。但應(yīng)注意二甲苯用量不可過多，否則，物鏡中的樹膠溶解，透鏡歪斜甚至脫落，蓋玻片移動甚至連同標(biāo)本一起融掉。

⒌使用時不可用手摸光學(xué)玻璃部分，如需擦拭應(yīng)嚴(yán)格按照光學(xué)部件擦拭辦法。

⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過厚或過薄。標(biāo)準(zhǔn)的蓋玻片為0.17±0.02毫米，載玻片為1.1±0.04毫米。過厚或過薄將會影響顯微鏡成像及觀察。

2.顯微鏡使用有什么注意事項(xiàng)?

1.低倍鏡的使用方法

(1)取鏡和放置：顯微鏡平時存放在柜或箱中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座，將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺上，鏡座后端距桌邊1-2寸為宜，便于坐著操作。

(2)對光：用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器（切忌手持物鏡移動），使低倍鏡對準(zhǔn)鏡臺的通光孔（當(dāng)轉(zhuǎn)動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準(zhǔn)鏡筒中心）。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察（右眼睜開），同時調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。

(3)放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。

(4)調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時針方向轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處，應(yīng)注意在上升鏡臺時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺上升，以免上升過多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。

如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心（注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的）。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時，鏡臺下降已超過工作距離（>5.40mm）而未見到物象，說明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺。

2.高倍鏡的使用方法

(1)選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。

(2)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時轉(zhuǎn)動速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察（防止高倍鏡頭碰撞玻片），如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新操作。

(3)調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時一般能見到一個不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時針移動約0.5-1圈，即可獲得清晰的物象（切勿用粗調(diào)節(jié)器！）

如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標(biāo)本時，必須順時針（切勿轉(zhuǎn)錯方向）轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降，方可取下玻片標(biāo)本。

3.生物顯微鏡油鏡的使用方法

(1)在使用油鏡之前，必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察，然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。

(2)將集光器上升到最高位置，光圈開到最大。

(3)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動油鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。

(4)用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。

如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找，在加油區(qū)之外重找時應(yīng)按：低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按：低倍→油鏡程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾污鏡頭。

(5)油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。

3.使用顯微鏡時應(yīng)注意哪些事項(xiàng)

（一） 顯微鏡的構(gòu)造及各部名稱 關(guān)于顯微鏡的結(jié)構(gòu)與使用方法已于生物學(xué)和組織胚胎學(xué)課程中學(xué)過，在寄生蟲學(xué)的學(xué)習(xí)中，要求進(jìn)一步熟練使用。

顯微鏡的構(gòu)造及各部名稱見圖1。 （二） 顯微鏡的使用 利用自然光源鏡檢時，最好用朝北的光源，不宜3采用直射陽光；利用人工光源時，宜用日光燈的光源。

鏡檢時身體要正對實(shí)習(xí)臺，采取端正的姿態(tài)，兩眼自然張開，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。

鏡檢時載物臺不可傾斜，因?yàn)楫?dāng)在五套載物臺傾斜時，液體或油易流出，既損壞了標(biāo)本，又污染載物臺，也影響檢查結(jié)果。 圖1 顯微鏡 鏡檢時應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動視野，直至整個標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。

顯微鏡的重光為對光，接物鏡的轉(zhuǎn)換及光線的調(diào)節(jié)。觀察寄生蟲標(biāo)本時，光線調(diào)節(jié)甚為重要。

因?yàn)樗^察的標(biāo)本如蟲卵、包囊等，均為自然光狀態(tài)的物體，有大有小，色澤有深有淺，有的無色透明，而低倍、高倍接物鏡轉(zhuǎn)換較多，故須隨著鏡檢時對不同標(biāo)本和要求，需要隨時調(diào)節(jié)焦距和光線，這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無色或未染色標(biāo)本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。

1. 對光： （1）將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。 （2）撥動反光鏡，調(diào)節(jié)至視野最亮無陰影。

反光鏡有平、凹兩面，光源強(qiáng)時用平面，較暗時用凹面，需要強(qiáng)光時，將聚光器提高，光圈放大；需要弱光時，將聚光器降低，或光圈適當(dāng)縮小。 （3）將待觀察的標(biāo)本置載物臺上，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標(biāo)本。

于轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器的同時，須俯身在鏡旁仔細(xì)觀察接物鏡與標(biāo)本之間的距離。 （4）左眼于接目鏡觀察，同時左手轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)，使鏡筒徐徐上升以調(diào)節(jié)焦距，使視野內(nèi)的物象看到上時即停，再調(diào)微調(diào)節(jié)器，至標(biāo)本清晰為止。

2. 接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié)： 顯微鏡一般具有三個接物鏡，即低倍、高倍及油鏡，固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤孔中。觀察標(biāo)本時，先使用低倍接物鏡，此時，視野較大，標(biāo)本較易查出，但放大倍數(shù)較?。ㄒ话惴糯?00倍），較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。

高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大（一般放大400倍），能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。 寄生蟲的蠕蟲卵，微絲蚴，原蟲的滋養(yǎng)體及包囊，昆蟲的幼蟲，均使用低、高倍鏡。

組織細(xì)胞內(nèi)的原蟲，則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察，如在低倍鏡下不能準(zhǔn)確鑒定所見的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時，則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。

使用油鏡觀察，一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀察。 3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別： （1）標(biāo)明放大倍數(shù)10*,40*,100*，或10/0.25,40/0.65,100/1.30。

(2)低倍鏡最短，高倍鏡較長，油鏡最長。 （3）鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大，高倍鏡較大，油鏡最小。

（4）油鏡頭上?？逃泻谏h(huán)圈，或“油”字。 4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法： （1）光線對好后，移動推進(jìn)器尋找需要觀察的標(biāo)本。

（2）如標(biāo)本的體積較大，不能清楚查見其構(gòu)造因而不能確認(rèn)時，則將標(biāo)本移至視野中央，再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。 （3）旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。

（4）調(diào)節(jié)聚光器及光圈，使視野內(nèi)的物象達(dá)到最清晰的程度。 5. 油鏡的使用方法： （1）原理：使用油鏡觀察時，需加香柏油，因?yàn)橛顽R需要進(jìn)入鏡頭的光線多，但油鏡的透氣孔最小，這樣進(jìn)入的光線就少，物體不易看清楚。

同時又因自玻片透過的光線，由于介質(zhì)（玻片-空氣-接物鏡）密度（玻片：n=1.52，空氣：n=1.0）不同而發(fā)生了折射散光，因此射入鏡頭的光線就更少，物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油，加于標(biāo)本與玻片之間，使光線不通過空氣，這樣射入鏡頭的光線就較多，物象就看得清楚（圖2）。

(2)油鏡的使用： a.將光線調(diào)至最強(qiáng)程度（聚光器提高，光圈全部開放）。 b.轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升，滴香柏油1小滴（不要過多，不要涂開）于接物鏡正下方標(biāo)本上。

c.轉(zhuǎn)動接物鏡轉(zhuǎn)換盤，使油鏡頭于鏡筒下方。 d.俯身鏡旁側(cè)面在肉眼的觀察下，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內(nèi)，輕輕接觸玻片為止。

e.慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使油鏡頭徐徐上升至見到標(biāo)本的物象為止。 f.轉(zhuǎn)動微調(diào)節(jié)器，使視野物象達(dá)到最清晰的程度。

g.左手徐徐移動推進(jìn)器，并轉(zhuǎn)動微調(diào)節(jié)器以觀察標(biāo)本。 h.標(biāo)本觀察完畢后，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器將鏡筒升起，取下標(biāo)本玻片。

立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。 6. 注意事項(xiàng)： （1）使用顯微鏡之前，應(yīng)熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法，特別應(yīng)掌握識別三種接物鏡之特征。

（2）寄生蟲學(xué)實(shí)習(xí)中所觀察的標(biāo)本，大多數(shù)為無色和顏色較淺，因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。 （3）新鮮標(biāo)本觀察時，須加蓋玻片，以免標(biāo)本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡，同時可使標(biāo)本表面勻平，光線得以集中，有利于觀察。

（三） 顯微鏡的保養(yǎng) 圖3 加用蓋玻片后，標(biāo)本表面勻平，光線得以集中，便于檢查示意圖1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時，右手緊握鏡臂，左手穩(wěn)托鏡座，輕輕取出。不要只用一只手提取，以防顯微鏡墜落，然后輕輕放在實(shí)習(xí)臺上或裝 入木箱內(nèi)。

2.顯微鏡放到實(shí)習(xí)臺上時，先放鏡座。

4.觀察植物細(xì)胞時顯微鏡使用注意事項(xiàng)

應(yīng)注意事項(xiàng)： ①保護(hù)好顯微鏡的鏡頭； ②旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋不要用力過猛； ③載物臺要保持清潔； ④使用低倍鏡觀察； ⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片； ⑥如何移動玻片來選擇較好的觀察部位； ⑦如何區(qū)分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。

詳細(xì)步驟： 關(guān)鍵是對光和觀察 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔； 轉(zhuǎn)動遮光器使最大的光圈對準(zhǔn)通光孔， 再注視目鏡 手調(diào)節(jié)反光嘗矗佰匪脂睹拌色飽姬鏡 使視野呈雪白色 把標(biāo)本放上去 轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降 然后就邊注視顯微鏡視野內(nèi) 邊調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋 直到視野出現(xiàn)物象 再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 使物象更清晰！。

5.顯微鏡的使用要注意哪些事項(xiàng)

1、條件許可情況下，建議試驗(yàn)室應(yīng)具備三防條件：防震、防潮、防塵；電源：220V±10%,50HZ；溫度：0°C—40°C。

2、亮度調(diào)整切忌忽大忽小，也不要過亮，影響燈泡的使用壽命，同時也有損視力。

3、所有（功能）切換，動作要輕，要到位。

4、關(guān)機(jī)時要將亮度調(diào)到最小。

5、調(diào)焦時注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡。

6、當(dāng)載物臺墊片圓孔中心的位置遠(yuǎn)離物鏡中心位置時不要切換物鏡，以免劃傷物鏡。

7、非專業(yè)人員不要調(diào)整照明系統(tǒng)（燈絲位置燈），以免影響成像質(zhì)量。

8、更換鹵素?zé)魰r要注意高溫，以免灼傷；注意不要用手直接接觸鹵素?zé)舻牟Ａw。

9、關(guān)機(jī)不使用時，將物鏡通過調(diào)焦機(jī)構(gòu)調(diào)整到最低狀態(tài)。

10、關(guān)機(jī)不使用時，不要立即該蓋防塵罩，待冷卻后再蓋，注意防火。

6.顯微鏡的注意事項(xiàng)

顯微鏡使用時的注意事項(xiàng)

1.取送方法要正確。因?yàn)榉垂忡R是通過鏡柄插放在鏡臂下面的，目鏡是插放在鏡筒上端的，所以，它們很容易滑落而損壞。取送顯微鏡時一定要右手握住鏡臂，左手托住鏡座，在任何情況下都不準(zhǔn)用一只手提著顯微鏡。另外，也不準(zhǔn)許學(xué)生取下反光鏡和目鏡亂照亂摸。

2.鏡頭的保護(hù)。目鏡和物鏡平時放在顯微鏡箱內(nèi)的專用的盒內(nèi)。上實(shí)驗(yàn)課期間，為了防止落上灰塵，要制作專用的塑料袋或布袋，課間時要隨時罩好。鏡頭臟了，只能用專用的擦鏡紙擦拭，擦?xí)r要順著一個方向擦。如果擦拭不凈，最好蘸一點(diǎn)二甲苯繼續(xù)擦。注意，決不能把鏡頭放到二甲苯中浸泡，這樣會使鏡頭開膠，鏡片脫落。

3.粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋的使用和防止鏡筒下滑。一般地說，粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋各轉(zhuǎn)動一周，可以使鏡筒分別移動10 mm和0.1 mm。要使鏡筒下降時，一定要用眼睛直接看著物鏡，使鏡筒緩緩下降。否則，很容易砸壞物鏡和玻片標(biāo)本。

顯微鏡使用時間過長，鏡筒容易出現(xiàn)下滑現(xiàn)象。如果情況不太嚴(yán)重，教師可以進(jìn)行如下簡易維修：老式顯微鏡鏡臂的上端有兩個控制鏡筒松緊的螺絲，只要順時針擰動螺絲，鏡筒就擰緊了；對于國產(chǎn)的新式顯微鏡，鏡筒的松緊是通過兩個粗準(zhǔn)焦螺旋來調(diào)節(jié)的。左手握緊左側(cè)粗準(zhǔn)焦螺旋，右手順時針方向擰緊粗準(zhǔn)焦螺旋，鏡筒就擰緊了。如果情況嚴(yán)重，要及時送到修理部門維修。

4.轉(zhuǎn)換器的使用。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器時，不要用手指扳著物鏡。這樣時間長了，容易使物鏡鏡頭松動，改變焦距，影響觀察的清晰度。正確的方法是手指握準(zhǔn)轉(zhuǎn)換器的邊緣進(jìn)行轉(zhuǎn)動。

5.制作目鏡上的指示針。在演示或考察學(xué)生觀察效果時，最好用帶有指示針的目鏡。簡易的做法是：輕輕拆開目鏡，將一根短頭發(fā)的一端用膠水粘在目鏡內(nèi)里的邊緣，另一端指向目鏡圓心的附近。觀察時，輕輕地轉(zhuǎn)動目鏡，指示針就能夠指出視野內(nèi)的不同部位。

7.觀察植物細(xì)胞時顯微鏡使用注意事項(xiàng)

應(yīng)注意事項(xiàng)：①保護(hù)好顯微鏡的鏡頭；②旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋不要用力過猛；③載物臺要保持清潔；④使用低倍鏡觀察；⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片；⑥如何移動玻片來選擇較好的觀察部位；⑦如何區(qū)分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。

詳細(xì)步驟：關(guān)鍵是對光和觀察轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔；轉(zhuǎn)動遮光器使最大的光圈對準(zhǔn)通光孔，再注視目鏡 手調(diào)節(jié)反光鏡 使視野呈雪白色把標(biāo)本放上去 轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降然后就邊注視顯微鏡視野內(nèi) 邊調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋直到視野出現(xiàn)物象 再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 使物象更清晰！。